離心分離樣品梯度回收方法之一---傾倒法

    用凱達(dá)離心機(jī)分離樣品結(jié)束后，必須收集梯度中的樣品以便進(jìn)一步分析，因此需要對(duì)梯度進(jìn)行分級(jí)取樣，在分級(jí)過(guò)程中要保護(hù)離心時(shí)得到的分離度。一般有直接收集和連續(xù)收集。
下面介紹直接回收區(qū)帶之傾倒法
該方法適用于差速離心。普通的醫(yī)用離心機(jī)離心沉淀或差速離心后，懸浮液就簡(jiǎn)單地分為上清液與沉淀兩個(gè)部分。所謂傾倒法就是將上清液傾倒出來(lái)，使上清液與沉淀分開，從上清液或沉淀中取得所要求收取的樣品部分。該法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)單、快捷、方便。

在這種直接取沉淀或上清液的離心分離中，如果形成的沉淀不“密實(shí)”，傾出上清液時(shí)，沉淀有時(shí)也會(huì)被倒出，有時(shí)沉淀與上清液發(fā)生重新混合。為了使上清液與沉淀分得清楚，可用提高轉(zhuǎn)速、增加離心力的方法使沉淀聚結(jié)得密實(shí)。這種做法有時(shí)往往并不可行，如果離心力過(guò)高，樣品在上清液中會(huì)造成失去；如果樣品存在于沉淀中，過(guò)分結(jié)實(shí)的沉淀可能會(huì)造成部分樣品的不可逆聚集、黏結(jié)，不能重新分散懸浮；當(dāng)轉(zhuǎn)速高、離心力很大時(shí)，大分子間的內(nèi)力受到影響如氫鍵作用等，樣品在離心管底部形成堅(jiān)硬的餅塊。這種情況下要根據(jù)樣品中雜質(zhì)存在的形式、結(jié)構(gòu)組成、s值大小來(lái)設(shè)置選擇轉(zhuǎn)速。傾倒上清液時(shí)應(yīng)該順沉淀形成的位置，傾倒時(shí)動(dòng)作應(yīng)該盡量地穩(wěn)、盡量避免搖晃。如下圖（如果沉降不夠密實(shí)，盡可能用吸管吸出上清液）。